TIG2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403443

Descripción general

RARRES2 codifica el gen 2 inducido por tazaroteno (TIG2), también conocido como quemerina, una adipocina secretada y quimioatrayente que señaliza principalmente a través de CMKLR1 y receptores relacionados para coordinar el tráfico de leucocitos y la vigilancia inmunitaria de los tejidos. TIG2 influye en las cascadas inflamatorias, la diferenciación de adipocitos y la homeostasis metabólica, vinculando la biología del tejido adiposo con la señalización inmunitaria innata y la función endotelial. La expresión desregulada de RARRES2/TIG2 se ha asociado con inflamación crónica y trastornos metabólicos, y se ha investigado en contextos que incluyen obesidad, resistencia a la insulina y fisiopatología cardiovascular. En biología del cáncer, la señalización de la quemerina se estudia por sus funciones en la configuración del microambiente tumoral y en la modulación del reclutamiento de células inmunitarias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TIG2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RARRES2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RARRES2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RARRES2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TIG2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RARRES2 para la investigación de la señalización de TIG2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RARRES2 críticos para la función de TIG2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RARRES2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TIG2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TIG2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RARRES2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TIG2 (h) y el plásmido HDR TIG2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RARRES2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RARRES2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.