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Thrombospondin 1双切口酶质粒(h) | sc-400436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Thrombospondin 1双切口酶质粒(h2) | sc-400436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
THBS1 编码血小板反应蛋白1(thrombospondin 1),这是一种分泌型基质细胞蛋白(matricellular)糖蛋白,可调节细胞-基质通讯以及细胞外基质重塑。血小板反应蛋白1通过受体介导的信号通路调控血管生成,其中包括影响潜在型 TGF-β 激活、整合素结合以及 CD47 依赖性反应的相互作用。它参与调控细胞黏附、迁移、增殖与炎症信号,将基质(间质)线索与组织修复程序相连接。THBS1 表达失调与癌症生物学、血管疾病以及纤维化和炎症性疾病中观察到的病理性重塑过程相关,因此适用于研究由微环境驱动表型的机制。
Thrombospondin 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 THBS1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对THBS1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏THBS1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了THBS1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。