Partículas Lentivirales de Activación (h) TGFβ2: sc-400496-LAC

TGFB2 codifica la citocina secretada factor de crecimiento transformante beta 2 (TGFβ2), un regulador pleiotrópico de las decisiones sobre el destino celular, que incluye la proliferación, la diferenciación, la transición epitelio‑mesénquima y la producción de matriz extracelular. Tras su activación a partir de su complejo latente, TGFβ2 señaliza principalmente a través de los receptores TGF‑β I/II para inducir la fosforilación de SMAD2/3 y programas transcripcionales, con crosstalk adicional con las vías MAPK, PI3K–AKT y de las GTPasas Rho. Este eje de señalización modela la remodelación tisular, las respuestas angiogénicas y la modulación inmunitaria de manera dependiente del contexto. La actividad desregulada de TGFB2/TGFβ2 está implicada en la remodelación fibrótica, anomalías del desarrollo y la biología del microambiente tumoral, por lo que es un foco frecuente en estudios mecanísticos de la homeostasis de la matriz y de la señalización impulsada por citocinas.

Las partículas de activación lentiviral TGFβ2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TGFB2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TGFβ2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TGFB2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TGFβ2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TGFB2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.