Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) TGF beta 1: sc-400067-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TGF beta 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TGF beta 1 (h) y el plásmido de doble nickasa TGF beta 1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TGFB1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TGF beta 1 Anticuerpo (3C11): sc-130348
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TGF beta 1 | sc-400067-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TGF beta 1 | sc-400067-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TGFB1 codifica el factor de crecimiento transformante beta 1 (TGF‑β1), una citocina secretada que transmite señales a través de TGFBR1/2 para activar la transcripción dependiente de SMAD2/3 e interactuar con las vías de MAPK, PI3K/AKT y las GTPasas de Rho. Es un regulador central de la remodelación de la matriz extracelular, la transición epitelio‑mesénquima, la inmunosupresión y los programas de cicatrización, e influye en la detención del ciclo celular y la diferenciación de manera dependiente del contexto. La desregulación de la señalización de TGF‑β1 está implicada en trastornos fibróticos, la remodelación del microambiente tumoral y la inflamación aberrante, lo que convierte a TGFB1 en un nodo común para estudiar la comunicación cruzada entre los compartimentos estromal e inmunitario.
TGF beta 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TGFB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TGFB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TGFB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TGFB1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.