Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) TGase2: sc-423375-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TGase2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TGase2 (m) y el plásmido de doble nickasa TGase2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tgm2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TGase2 Anticuerpo (4G3): sc-73612
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TGase2 | sc-423375-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Tgm2** codifica la transglutaminasa 2 (TGase2), una enzima multifuncional dependiente de Ca²⁺ que cataliza reacciones de entrecruzamiento de proteínas, desamidación y poliaminación, remodelando así la matriz extracelular y estabilizando complejos proteicos. TGase2 también actúa como una proteína de señalización con unión a GTP y participa en la adhesión mediada por integrinas, la dinámica del citoesqueleto y la regulación de respuestas de estrés e inflamatorias asociadas a NF-κB y TGF-β. A través de estas actividades, TGase2 influye en la apoptosis, la autofagia, la reparación de heridas y la remodelación fibrótica, y la expresión o actividad alteradas de TGase2 se han vinculado con modelos de enfermedades inflamatorias, fibrosis tisular, neurodegeneración y la biología del microambiente tumoral. Por ello, **Tgm2** se utiliza ampliamente como un nodo para estudiar la biología de la matriz, la señalización inmunitaria y la adaptación celular al estrés en sistemas murinos.
TGase2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tgm2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tgm2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tgm2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tgm2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.