Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TGase2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423375
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TGase2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TGase2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TGase2 Anticuerpo (4G3): sc-73612
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TGase2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423375 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Tgm2 del ratón codifica la transglutaminasa 2 (TGase2), una enzima multifuncional dependiente de Ca2+ que cataliza el entrecruzamiento de proteínas, la desamidación y la poliaminación, y que además presenta actividades de unión a GTP y de andamiaje. TGase2 regula la remodelación de la matriz extracelular, la adhesión y migración celular, la apoptosis y la señalización inflamatoria, interactuando con vías como NF-κB, TGF-β, integrina/FAK y programas de cicatrización. Su actividad influye en la dinámica del citoesqueleto y en la rigidez de la matriz, vinculando a Tgm2 con la remodelación fibrótica y las respuestas de reparación tisular. La función desregulada de TGase2 se ha asociado, en modelos preclínicos, con neuroinflamación, adaptación al estrés metabólico y remodelación del microambiente tumoral, lo que impulsa estudios mecanísticos en tipos celulares de ratón relevantes.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TGase2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tgm2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tgm2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tgm2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TGase2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tgm2 para la investigación de la señalización de TGase2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tgm2 críticos para la función de TGase2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tgm2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TGase2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TGase2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tgm2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TGase2 (m) y el plásmido HDR TGase2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tgm2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tgm2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.