TF Lentiviral Activation Particles (m2): sc-420268-LAC-2

マウスF3は組織因子（TF）をコードしており、TFは細胞膜貫通型の分子として外因系凝固カスケードを開始し、第VII因子／VIIa因子に結合して下流の第X因子の活性化とトロンビン産生を促進する。止血にとどまらず、TFシグナルはプロテアーゼ活性化受容体（PAR）依存性経路と連関し、内皮系および骨髄系の文脈において炎症、血管リモデリング、細胞遊走に影響を与える。F3/TF発現の制御異常は病的血栓症、敗血症関連凝固障害、腫瘍関連の凝固促進活性に関与するとされ、凝固と自然免疫応答を結び付ける重要な結節点となっている。マウスF3の遺伝子編集は、凝固因子複合体の形成機構、TF駆動性PARシグナル伝達、ならびに血栓炎症表現型や血管傷害応答を評価するin vivoモデルに関する機序解明研究を可能にする。

TF レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なF3の発現上昇を可能にします。

TF レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、F3転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性TFの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のF3ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。