TC-PTP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422509

Übersicht

Das murine Gen **Ptpn2** kodiert die T‑Zell-Protein-Tyrosinphosphatase (TC‑PTP), eine nicht-rezeptorassoziierte Protein-Tyrosinphosphatase, die durch Dephosphorylierung zentraler Signalmoleküle Zytokin- und Wachstumsfaktor-Signalwege dämpft. TC‑PTP reguliert die JAK/STAT-Signalübertragung negativ und kann Phosphorylierungsereignisse am Insulinrezeptor sowie EGFR-assoziierte Phosphorylierungen modulieren, wodurch Transkriptionsprogramme geprägt werden, die Proliferation, Überleben und Immunaktivierung steuern. Über diese Funktionen trägt **Ptpn2** zur Aufrechterhaltung der Immunhomöostase und der Integrität epithelialer Barrieren bei; eine Fehlregulation wurde in experimentellen Modellen mit entzündlichen und autoimmunen Phänotypen sowie mit veränderten, tumorassoziierten Signalwegen in Verbindung gebracht. Entsprechend wird **Ptpn2** breit untersucht, um Mechanismen der Zytokinantwort, Schwellenwerte der T‑Zell-Signalgebung und die Biologie entzündungsgetriebener Erkrankungen zu verstehen.

Das TC-PTP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ptpn2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ptpn2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ptpn2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TC-PTP-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ptpn2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TC-PTP-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ptpn2-Exone abzielen, die für die TC-PTP-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ptpn2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TC-PTP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TC-PTP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ptpn2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TC-PTP HDR-Plasmid (m) und TC-PTP HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ptpn2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ptpn2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.