TBX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405763-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TBX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TBX1 Double Nickase Plasmid (h) e il TBX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TBX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TBX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405763-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TBX1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405763-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX1 codifica un fattore di trascrizione della famiglia T-box che regola programmi di espressione genica essenziali per il patterning embrionale, in particolare nello sviluppo dell’apparato faringeo e cardioparingeo. TBX1 agisce nel nucleo coordinando la specificazione delle linee cellulari e la morfogenesi attraverso il controllo trascrizionale di reti di segnalazione dello sviluppo, inclusa l’interazione con vie come la segnalazione FGF e dell’acido retinoico. La disregolazione o l’aploinsufficienza di TBX1 è fortemente associata ai fenotipi della sindrome da delezione 22q11.2/spettro di DiGeorge, inclusi difetti cardiaci congeniti e anomalie craniofacciali. In quanto regolatore dello sviluppo, TBX1 è ampiamente studiato per analizzare i circuiti di regolazione genica che controllano le decisioni di destino cellulare e la morfogenesi dei tessuti.
TBX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TBX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TBX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TBX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TBX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.