Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TANC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406741
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TANC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TANC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TANC Anticuerpo (H-8): sc-514679
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TANC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406741 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TANC1 codifica TANC, una proteína andamiaje multidominio enriquecida en sinapsis excitadoras, donde contribuye a la organización de la densidad postsináptica y al ensamblaje de complejos de señalización. A través de sus interacciones con receptores sinápticos y reguladores del citoesqueleto, TANC participa en la morfogénesis de las espinas dendríticas, la estabilidad sináptica y la remodelación dependiente de la actividad. Estas funciones sitúan a TANC1 dentro de vías de desarrollo neuronal y plasticidad sináptica que influyen en la formación de circuitos y la señalización homeostática. La regulación alterada del andamiaje sináptico y de la conectividad se ha vinculado a mecanismos de enfermedad del neurodesarrollo y neuropsiquiátrica, lo que convierte a TANC1 en un locus útil para estudiar relaciones genotipo-fenotipo en modelos neuronales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TANC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TANC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TANC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TANC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TANC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TANC1 para la investigación de la señalización de TANC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TANC1 críticos para la función de TANC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TANC1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TANC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TANC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TANC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TANC (h) y el plásmido HDR TANC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TANC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TANC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.