Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TAL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401101-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TAL1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TAL1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TAL1 Anticuerpo (C-4): sc-393287
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TAL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401101-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TAL1 (proteína 1 de leucemia linfoblástica aguda de células T) es un factor de transcripción de tipo hélice–bucle–hélice básico que regula la especificación de linaje y los programas de diferenciación durante el desarrollo hematopoyético, en particular en los compartimentos eritroide y de células T. Funciona dentro de complejos transcripcionales multiproteicos con socios como E2A/TCF3, LMO2, LDB1 y factores GATA para controlar la actividad de los potenciadores (enhancers) y la accesibilidad de la cromatina en genes que gobiernan la proliferación y la maduración. TAL1 integra redes de señalización y transcripción que determinan las decisiones de destino de las células madre/progenitoras hematopoyéticas y mantiene estados transcripcionales dependientes del contexto. La expresión desregulada de TAL1 o el “secuestro” de potenciadores (enhancer hijacking) se asocia fuertemente con la biología de la leucemia linfoblástica aguda de células T y con alteraciones más amplias del circuito transcripcional hematopoyético.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TAL1 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TAL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TAL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TAL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TAL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TAL1 para la investigación de la señalización de TAL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TAL1 críticos para la función de TAL1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TAL1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TAL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TAL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TAL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TAL1 (h) y el plásmido HDR TAL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TAL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TAL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.