Plásmido Doble Nickase (h) T2-cadherin: sc-401926-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)T2-cadherin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T2-cadherin (h) y el plásmido de doble nickasa T2-cadherin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDH10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) T2-cadherin | sc-401926-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) T2-cadherin | sc-401926-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH10 codifica la T2-cadherina, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio de la superfamilia de las cadherinas que contribuye al patrón tisular y al mantenimiento de la arquitectura epitelial y neuronal. Mediante adhesión homofílica y su acoplamiento a complejos asociados a cateninas, la T2-cadherina influye en la organización del citoesqueleto, la señalización dependiente del contacto y los programas de migración celular. La expresión de CDH10 y las variaciones en su secuencia se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con conectividad de circuitos alterada, y la desregulación de la adhesión mediada por cadherinas es ampliamente relevante para procesos oncogénicos como la invasión y la metástasis. Por ello, CDH10 se estudia con frecuencia en modelos de adhesión celular, morfogénesis, conectividad sináptica y cambios dependientes del contexto en la diferenciación y la motilidad.
T2-cadherin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDH10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDH10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDH10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDH10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.