Plásmido Doble Nickase (h) T-bet/TBX21: sc-400480-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)T-bet/TBX21 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T-bet/TBX21 (h) y el plásmido de doble nickasa T-bet/TBX21 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TBX21. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: T-bet/TBX21 Anticuerpo (4B10): sc-21749
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) T-bet/TBX21 | sc-400480-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) T-bet/TBX21 | sc-400480-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX21 codifica T-bet, un factor de transcripción de la familia T-box que coordina los programas inmunitarios de tipo 1 al promover la expresión de IFNG y reforzar el compromiso con el linaje Th1, a la vez que antagoniza destinos alternativos de las células T colaboradoras. T-bet integra señales aguas abajo de las vías de citocinas y del receptor de antígeno, incluidas IL-12/STAT4 e IFN-γ/STAT1, para moldear la accesibilidad de la cromatina y las redes transcripcionales en células T CD4+ y CD8+, así como en células NK. Mediante el control de la diferenciación efectora, la función citotóxica y el equilibrio de citocinas inflamatorias, TBX21 se estudia ampliamente en contextos de infección crónica, inmunobiología tumoral y enfermedad inflamatoria mediada por el sistema inmunitario. La actividad o expresión desregulada de TBX21 se ha vinculado con una polarización inmunitaria aberrante y una inflamación tisular alterada, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación inmunitaria.
T-bet/TBX21 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TBX21 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TBX21. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TBX21. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TBX21 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.