Partículas Lentivirales de Activación (h) SYNDIG1: sc-408960-LAC
- Especies Diana: human
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) SYNDIG1 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) SYNDIG1 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el SYNDIG1 Plásmido de activación lentiviral (h) y el SYNDIG1 Plásmido de activación lentiviral (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor SYNDIG1. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SYNDIG1 Anticuerpo (C-1): sc-515627
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (h) SYNDIG1 | sc-408960-LAC | 200 µl | $455.00 |
SYNDIG1 (gen 1 inducido por la diferenciación sináptica) codifica una proteína neuronal asociada a la membrana implicada en el desarrollo de sinapsis excitatorias y en la organización de complejos de señalización postsináptica. Se asocia con la regulación de la maduración sináptica, el tráfico de receptores y de proteínas de andamiaje, y vías de plasticidad dependiente de la actividad que moldean la neurotransmisión glutamatérgica. A través de estos procesos, SYNDIG1 es relevante para los mecanismos que controlan la formación de circuitos y la fuerza sináptica, y despierta interés en la investigación de la biología de enfermedades del neurodesarrollo y neuropsiquiátricas en las que se alteran el equilibrio excitatorio/inhibitorio y la integridad sináptica. La modulación de la expresión de SYNDIG1 ofrece un enfoque manejable para estudiar el ensamblaje sináptico y las respuestas transcripcionales y proteómicas posteriores en sistemas modelo de neuronas humanas.
Las partículas de activación lentiviral SYNDIG1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SYNDIG1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral SYNDIG1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SYNDIG1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de SYNDIG1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SYNDIG1 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.