Plásmido Doble Nickase (h) SYND4/SDC4/Syndecan-4: sc-400502-NIC

SDC4 codifica el sindecán-4 (SYND4), un proteoglucano transmembrana de sulfato de heparán expresado de manera ubicua que actúa como correceptor de componentes de la matriz extracelular, factores de crecimiento y quimiocinas. Al coordinar la participación de las integrinas y la señalización de factores de crecimiento, el sindecán-4 regula el ensamblaje de adhesiones focales, la remodelación del citoesqueleto de actina y la migración celular a través de vías que incluyen la activación de PKCα y la modulación de las GTPasas de la familia Rho. Contribuye a la mecanotransducción y a la comunicación célula–matriz en procesos como la reparación de heridas, la inflamación y la remodelación vascular. La desregulación de la expresión de SDC4 o su escisión ("shedding") se ha asociado con remodelación fibrótica e invasión tumoral, lo que lo convierte en un objetivo útil para investigar redes de señalización dependientes de la adhesión.

SYND4/SDC4/Syndecan-4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SDC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SDC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SDC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SDC4 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.