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Synaptojanin 2CRISPR激活质粒(h) | sc-411221-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Synaptojanin 2CRISPR激活质粒(h2) | sc-411221-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SYNJ2 编码突触肌动蛋白相关蛋白 2(synaptojanin 2),这是一种多磷酸肌醇磷酸酶,可水解 PI(4,5)P2 及相关磷脂酰肌醇磷酸,从而调控膜的身份识别与运输。通过控制网格蛋白介导的内吞、内体回收以及肌动蛋白细胞骨架动力学,synaptojanin 2 有助于在质膜层面协调受体内化与信号输出。其活性将磷脂酰肌醇磷酸的周转与细胞迁移、黏附和囊泡动力学等通路连接起来——这些过程常在肿瘤生物学和神经生物学研究中被重点探讨。SYNJ2 表达或功能的改变与受体运输失调及侵袭性表型相关,支持其在信号依赖的细胞重塑研究中的重要性。
Synaptojanin 2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SYNJ2的表达。
Synaptojanin 2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SYNJ2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SYNJ2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Synaptojanin 2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SYNJ2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Synaptojanin 2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SYNJ2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Synaptojanin 2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。