Synaptogyrin-3CRISPR激活质粒(h): sc-403955-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Synaptogyrin-3 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Synaptogyrin-3 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Synaptogyrin-3 CRISPR 激活质粒 (h) 和 Synaptogyrin-3 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 SYNGR3 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Synaptogyrin-3: sc-271046，通过WB, IF或者IHC分析
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Synaptogyrin-3CRISPR激活质粒(h) | sc-403955-ACT | 20 µg | $397.00 |
SYNGR3 编码突触囊泡蛋白 Synaptogyrin-3，这是一种在神经元中富集的突触囊泡膜蛋白，参与调控囊泡运输、囊泡库动态以及神经递质释放。Synaptogyrin 家族蛋白参与突触前膜的组织构建，并可通过调节囊泡回收以及与胞吐和胞吞过程的耦联来影响突触可塑性。突触囊泡功能异常和突触前信号改变是多种神经精神疾病与神经退行性疾病生物学中的反复出现的特征，因此 SYNGR3 是研究突触功能障碍机制的相关靶点。作为一种在神经元中表达、与囊泡相关的因子，SYNGR3 有助于解析维持突触前稳态及活动依赖性突触重塑的调控通路。
Synaptogyrin-3 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SYNGR3的表达。
Synaptogyrin-3 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SYNGR3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SYNGR3转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Synaptogyrin-3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SYNGR3位点，并能够研究内源性位点上依赖于Synaptogyrin-3的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SYNGR3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Synaptogyrin-3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。