Partículas Lentivirales de Activación (h) Superoxide Dismutase 1/SOD1: sc-400186-LAC

El SOD1 humano codifica la superóxido dismutasa citosólica Cu/Zn, una enzima antioxidante clave que cataliza la conversión de los radicales superóxido en peróxido de hidrógeno y oxígeno molecular para preservar la homeostasis redox. Al limitar la acumulación de especies reactivas de oxígeno, SOD1 influye en la función mitocondrial, la proteostasis y las vías de señalización de respuesta al estrés, como los programas antioxidantes regulados por NRF2 y la señalización inflamatoria sensible al estado redox. La alteración de la actividad de SOD1 o su mal plegamiento se asocia con daño oxidativo y vulnerabilidad neuronal, con una relevancia bien establecida para la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y para modelos más amplios de neurodegeneración. SOD1 también se estudia ampliamente en cáncer, lesión por isquemia-reperfusión y contextos de estrés metabólico en los que las especies reactivas de oxígeno determinan la supervivencia, la diferenciación y la señalización celular.

Las partículas de activación lentiviral Superoxide Dismutase 1/SOD1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SOD1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Superoxide Dismutase 1/SOD1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SOD1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Superoxide Dismutase 1/SOD1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SOD1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.