SULT1C2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406300

Descripción general

SULT1C2 codifica una sulfotransferasa citosólica que cataliza la transferencia de un grupo sulfato desde la 3′-fosfoadenosina-5′-fosfosulfato (PAPS) a sustratos que contienen grupos hidroxilo y amina, aumentando su polaridad y modulando su biodisponibilidad. Como parte del metabolismo de fase II, SULT1C2 participa en procesos de biotransformación de xenobióticos y compuestos endógenos que influyen en el manejo celular de hormonas, sustancias químicas ambientales y compuestos dietarios. Su actividad se integra con redes más amplias de desintoxicación y puede moldear perfiles de metabolitos que afectan las respuestas al estrés oxidativo y el tono de señalización. La alteración de la capacidad de sulfatación se ha relacionado con diferencias interindividuales en la susceptibilidad a sustancias químicas y se ha estudiado en el contexto del metabolismo de carcinógenos y de fenotipos relevantes para la toxicología.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SULT1C2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SULT1C2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SULT1C2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SULT1C2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SULT1C2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SULT1C2 para la investigación de la señalización de SULT1C2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SULT1C2 críticos para la función de SULT1C2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SULT1C2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SULT1C2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SULT1C2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SULT1C2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SULT1C2 (h) y el plásmido HDR SULT1C2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SULT1C2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SULT1C2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.