Stat5a Plásmido CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437303

Descripción general

STAT5A (transductor de señales y activador de la transcripción 5A) es un factor de transcripción citoplasmático latente que se activa aguas abajo de las quinasas JAK en respuesta a citocinas y factores de crecimiento, incluidos la prolactina, la hormona del crecimiento y las interleucinas. Tras la fosforilación, Stat5a dimeriza, se transloca al núcleo y regula programas génicos que controlan la proliferación, la diferenciación, la supervivencia y la homeostasis metabólica en diversos tejidos. En modelos de rata, la señalización de Stat5a contribuye a la regulación de los linajes hematopoyéticos y a redes transcripcionales sensibles a señales endocrinas, lo que la hace relevante para estudios de desregulación inmunitaria, fenotipos vinculados a la inflamación y remodelado dependiente de hormonas. La alteración de la actividad de STAT5A se utiliza con frecuencia para investigar la arquitectura de la vía JAK/STAT y la comunicación cruzada transcripcional con la señalización MAPK y PI3K.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Stat5a (r) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rat. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Stat5a.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de Stat5a, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de Stat5a
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Stat5a CRISPR/Cas9 KO (r) y el plásmido Stat5a CRISPR/Cas9 KO (r2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Stat5a (r) y el plásmido HDR Stat5a (r2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.