Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) Stat3: sc-423176-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Stat3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Stat3 (m) y el plásmido de doble nickasa Stat3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Stat3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Stat3 Anticuerpo (F-2): sc-8019
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Stat3 | sc-423176-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Stat3 | sc-423176-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Stat3 de ratón codifica el Transductor de Señales y Activador de la Transcripción 3 (STAT3), un factor de transcripción latente que se activa aguas abajo de receptores de citocinas y de factores de crecimiento. Tras su fosforilación por quinasas JAK o por quinasas de tirosina asociadas al receptor, STAT3 dimeriza y se transloca al núcleo para regular programas que controlan la proliferación, la supervivencia, la inflamación y estados celulares con características de células madre. La señalización de STAT3 integra entradas de citocinas de la familia de IL-6 e interactúa con vías como NF-κB, PI3K–AKT y MAPK para modular la homeostasis inmunitaria y tisular. La actividad desregulada de STAT3 se estudia con frecuencia en modelos de inflamación crónica, disfunción inmunitaria, fibrosis y transformación oncogénica para definir resultados transcripcionales y epigenéticos dependientes del contexto.
Stat3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Stat3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Stat3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Stat3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Stat3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.