Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Stat3 Double Nickase Plasmid (m): sc-423176-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Stat3 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Stat3 Double-Nickase-Plasmid (m) und Stat3 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Stat3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Stat3: sc-8019
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Stat3 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423176-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat3 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-423176-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen *Stat3* kodiert den Signal Transducer and Activator of Transcription 3 (STAT3), einen latenten Transkriptionsfaktor, der nachgeschaltet von Zytokin- und Wachstumsfaktorrezeptoren aktiviert wird. Nach der Phosphorylierung durch JAK-Kinasen oder rezeptorassoziierte Tyrosinkinasen dimerisiert STAT3 und transloziert in den Zellkern, wo es Programme reguliert, die Proliferation, Überleben, Entzündung und stammzellähnliche Zellzustände steuern. Die STAT3-Signalübertragung integriert Signale von Zytokinen der IL-6-Familie und überschneidet sich mit Signalwegen wie NF-κB, PI3K–AKT und MAPK, um die Immun- und Gewebehomöostase zu formen. Eine fehlregulierte STAT3-Aktivität wird häufig in Modellen chronischer Entzündung, Immunstörungen, Fibrose und onkogener Transformation untersucht, um kontextspezifische transkriptionelle und epigenetische Effekte zu definieren.
Stat3 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Stat3-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Stat3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Stat3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Stat3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.