Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
STARS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406050
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- STARS El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico STARS, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: STARS Anticuerpo (E-9): sc-393062
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
STARS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406050 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ABRA codifica STARS (activador del músculo estriado de la señalización de Rho), una proteína de unión a actina enriquecida en músculo cardíaco y esquelético que conecta la dinámica del citoesqueleto con el control transcripcional. STARS potencia la señalización de RhoA y modula la regulación dependiente de actina de la expresión génica dirigida por SRF/MRTF, integrando señales mecánicas y contráctiles con programas miogénicos y de respuesta al estrés. A través de estas vías, ABRA influye en la diferenciación muscular, la remodelación hipertrófica y las respuestas celulares a la carga y la lesión. La actividad desregulada de STARS se ha asociado con firmas transcripcionales relevantes para cardiomiopatías y miopatías, lo que convierte a ABRA en un objetivo útil para investigar la señalización del citoesqueleto al núcleo en la biología muscular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO STARS (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ABRA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ABRA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ABRA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STARS.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ABRA para la investigación de la señalización de STARS, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ABRA críticos para la función de STARS
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ABRA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido STARS CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido STARS CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ABRA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STARS (h) y el plásmido HDR STARS (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ABRA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ABRA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.