Plasmide CRISPR/Cas9 KO Stabilin-1 (h): sc-406773

Présentation

STAB1 code pour Stabilin-1, un récepteur « scavenger » multifonctionnel principalement exprimé par les cellules endothéliales et les macrophages activés de manière alternative, où il favorise l’endocytose et l’élimination d’une grande diversité de ligands, notamment des lipoprotéines modifiées et du matériel dérivé de cellules apoptotiques. Par ses rôles dans la capture médiée par des récepteurs, le trafic intracellulaire et l’adhésion cellulaire, Stabilin-1 contribue à l’homéostasie vasculaire, à la régulation immunitaire et aux processus de remodelage au sein des microenvironnements tissulaires. L’activité de STAB1 est fréquemment étudiée dans le contexte de la polarisation des macrophages et du dialogue croisé entre stroma et système immunitaire, qui façonnent la signalisation inflammatoire et le renouvellement de la matrice extracellulaire. Une expression dérégulée de STAB1 a été associée à des états inflammatoires chroniques et à la biologie des macrophages associés aux tumeurs, offrant un point d’entrée mécanistique pour examiner les contributions myéloïdes aux microenvironnements pertinents pour la maladie.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Stabilin-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène STAB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du STAB1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert STAB1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Stabilin-1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en STAB1 pour l'étude de la signalisation de Stabilin-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de STAB1 essentiels à la fonction de Stabilin-1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de STAB1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Stabilin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Stabilin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus STAB1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Stabilin-1 plasmide HDR (h) et le Stabilin-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie STAB1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles STAB1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.