SSTR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403410
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SSTR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SSTR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SSTR1 Anticuerpo (1F7): sc-293490
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SSTR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403410 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SSTR1 codifica el receptor de somatostatina 1, un GPCR acoplado a Gi/o que se une a la somatostatina para atenuar la actividad de la adenilil ciclasa, reducir el AMPc intracelular y modular la conductancia de los canales iónicos. A través de la señalización de GPCR, SSTR1 influye en cascadas asociadas a MAPK y PI3K y contribuye a la regulación de la excitabilidad neuronal, la secreción endocrina y el control del ciclo celular de manera dependiente del contexto. La actividad del receptor modela la comunicación neuroendocrina y las vías de liberación hormonal, y la alteración de la señalización de somatostatina se ha estudiado en trastornos que implican secreción, proliferación y neurotransmisión desreguladas. Por ello, SSTR1 es un objetivo útil para desentrañar redes inhibitorias de GPCR y el “cross-talk” entre vías en modelos celulares humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SSTR1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SSTR1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SSTR1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SSTR1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SSTR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SSTR1 para la investigación de la señalización de SSTR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SSTR1 críticos para la función de SSTR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SSTR1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SSTR1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SSTR1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SSTR1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SSTR1 (h) y el plásmido HDR SSTR1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SSTR1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SSTR1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.