Plasmide Double Nickase (h) SSB-1: sc-408087-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SSB-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SSB-1 Double Nickase (h) et le plasmide SSB-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SPSB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SSB-1 | sc-408087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SSB-1 | sc-408087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SPSB1** code **SSB-1**, une protéine adaptatrice contenant un domaine SPRY qui, via sa boîte SOCS, relie des substrats spécifiques aux complexes ligase ubiquitine Cullin-RING, favorisant leur ubiquitinylation et leur dégradation par le protéasome. Par cette activité associée aux ligases E3, SSB-1 contribue à la régulation de la stabilité des protéines dans des voies contrôlant la signalisation des cytokines et de l’immunité innée, notamment en modulant des réponses liées à JAK/STAT. SPSB1 a été étudié comme un régulateur négatif de la signalisation inflammatoire et des programmes de gènes stimulés par l’interféron, ce qui en fait un nœud utile pour analyser le contrôle par rétroaction dans la défense de l’hôte. Une expression ou une fonction altérée de SPSB1 peut influencer la dérégulation immunitaire et des phénotypes associés à l’inflammation, ce qui le rend pertinent pour des études mécanistiques dans des modèles de cellules immunitaires et épithéliales.
SSB-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SPSB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SPSB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SPSB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SPSB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.