Plásmido Doble Nickase (h) SSB-1: sc-408087-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SSB-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SSB-1 (h) y el plásmido de doble nickasa SSB-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SPSB1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SSB-1 | sc-408087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SSB-1 | sc-408087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **SPSB1** codifica **SSB-1**, una proteína adaptadora que contiene un dominio SPRY y que, mediante su caja SOCS, conecta sustratos específicos con complejos de ligasa de ubiquitina **Cullin-RING**, promoviendo la ubiquitinación y su degradación por el proteasoma. A través de esta actividad asociada a ligasas E3, SSB-1 contribuye a la regulación de la estabilidad proteica en vías que controlan la señalización de citocinas y de la inmunidad innata, incluida la modulación de respuestas relacionadas con **JAK/STAT**. **SPSB1** se ha estudiado como un regulador negativo de la señalización inflamatoria y de los programas de genes estimulados por interferón, lo que lo sitúa como un nodo útil para analizar el control por retroalimentación en la defensa del huésped. Alteraciones en la expresión o la función de **SPSB1** pueden influir en la desregulación inmunitaria y en fenotipos asociados a la inflamación, por lo que es relevante para estudios mecanísticos en modelos celulares inmunitarios y epiteliales.
SSB-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SPSB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SPSB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SPSB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SPSB1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.