Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SRPK2 Double Nickase Plasmid (h): sc-403763-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SRPK2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SRPK2 Double-Nickase-Plasmid (h) und SRPK2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SRPK2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SRPK2: sc-390534
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SRPK2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403763-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SRPK2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403763-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SRPK2 (Serin/Arginin-reiche Proteinkinase 2) ist eine Dual-Spezifitätskinase, die SR-Spleißfaktoren phosphoryliert und dadurch die Assemblierung des Spleißosoms sowie das alternative prä-mRNA-Spleißen koordiniert. Über die Regulation der RNA-Prozessierung beeinflusst SRPK2 die Zellzyklusprogression, Stresssignalwege und die Diversifizierung des Proteoms und kann funktionell mit kinasegetriebenen Signalwegen verknüpft sein, die die transkriptionelle und posttranskriptionelle Genregulation prägen. Eine veränderte SRPK2-Aktivität wurde in der Literatur mit fehlregulierten Spleißprogrammen sowie aberranten Proliferations- oder Stressanpassungs-Phänotypen in Verbindung gebracht, was SRPK2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der RNA-Biologie bei Krebs und anderen Erkrankungen mit Spleißdefekten macht.
SRPK2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SRPK2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SRPK2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SRPK2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SRPK2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.