SRPK1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423158
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SRPK1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SRPK1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SRPK1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423158 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Srpk1 de ratón codifica la quinasa 1 específica de proteínas ricas en serina/arginina (SRPK1), un regulador clave del empalme (splicing) del pre-ARNm mediante la fosforilación de proteínas SR como los factores SRSF, lo que influye en su localización nuclear y en el ensamblaje del espliceosoma. Al acoplar señales celulares a decisiones de empalme alternativo, SRPK1 afecta programas de expresión génica que controlan la proliferación, las respuestas al estrés y la diferenciación. La actividad de SRPK1 se entrecruza con redes de procesamiento de ARN vinculadas al control del ciclo celular y a la regulación posranscripcional, lo que la hace relevante para estudios sobre el empalme desregulado observado en cáncer, neurodegeneración y contextos inflamatorios. En sistemas murinos, la perturbación de SRPK1 se utiliza habitualmente para dilucidar cómo la señalización de quinasas del splicing moldea isoformas de transcritos específicas de tejido y los fenotipos resultantes.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SRPK1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Srpk1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Srpk1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Srpk1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SRPK1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Srpk1 para la investigación de la señalización de SRPK1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Srpk1 críticos para la función de SRPK1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Srpk1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SRPK1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SRPK1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Srpk1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SRPK1 (m) y el plásmido HDR SRPK1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Srpk1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Srpk1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.