SREC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406838

Descripción general

SCARF1 codifica el receptor depurador expresado por células endoteliales (SREC), un receptor depurador de clase F que se une e internaliza una amplia variedad de ligandos, incluidas lipoproteínas modificadas y macromoléculas polianiónicas. SREC contribuye al tráfico endocítico, la adhesión celular y la eliminación de material extracelular, conectando el endotelio vascular y la vigilancia inmunitaria con las vías homeostáticas de captación. A través de sus funciones en el reconocimiento e internalización de ligandos, SCARF1 se estudia en procesos como la inflamación, las respuestas al estrés oxidativo y la biología vascular, donde la actividad alterada de los receptores depuradores puede influir en los microambientes tisulares. La desregulación de las vías de receptores depuradores se ha asociado con mecanismos de enfermedades cardiometabólicas e inflamatorias, lo que respalda a SCARF1 como una diana útil para analizar las interacciones endotelio–inmunidad en sistemas modelo humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SREC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SCARF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SCARF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SCARF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SREC.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SCARF1 para la investigación de la señalización de SREC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SCARF1 críticos para la función de SREC
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SCARF1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SREC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SREC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SCARF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SREC (h) y el plásmido HDR SREC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SCARF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SCARF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.