SPRED2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404738-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPRED2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SPRED2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SPRED2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SPRED2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPRED2 Anticorpo (6G8): sc-517018
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPRED2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404738-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SPRED2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404738-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SPRED2 (Sprouty related EVH1 domain containing 2) é uma proteína adaptadora citosólica que atua como regulador negativo da sinalização de receptores tirosina-quinase, ao conter a ativação da via RAF/MEK/ERK (MAPK). Ao interagir com componentes como RAF e modular complexos de sinalização dependentes de RAS, a SPRED2 ajuda a controlar a proliferação, a diferenciação e as respostas inflamatórias induzidas por fatores de crescimento. Alterações na expressão ou na função de SPRED2 têm sido associadas a programas desregulados de sinalização MAPK implicados em diversos contextos da biologia do câncer e de processos mediados pelo sistema imune, o que reforça sua utilidade como um ponto de referência para estudar atenuação de sinal e controle por feedback. Em células humanas, a perturbação de SPRED2 oferece uma abordagem viável para investigar o crosstalk entre a sinalização MAPK e os desfechos transcricionais e citoesqueléticos a jusante.
SPRED2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SPRED2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SPRED2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SPRED2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SPRED2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.