SPAG17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410482

Descripción general

SPAG17 codifica el antígeno 17 asociado a espermatozoides, un componente estructural y regulador del aparato axonemal que sostiene la función de los cilios y flagelos móviles. Participa en procesos basados en microtúbulos y contribuye a la mecánica de batido impulsada por dineína necesaria para una motilidad celular eficaz y para la propulsión de fluidos a través de los epitelios. En biología humana, la alteración de la expresión o la disrupción de SPAG17 se asocia con defectos en la espermatogénesis y en la motilidad espermática, y es relevante para fenotipos más amplios vinculados a ciliopatías que implican alteraciones de la estructura y la señalización ciliar. Como proteína asociada a cilios/flagelos, SPAG17 también es útil para explorar cómo la organización del citoesqueleto se integra con la dinámica del ciclo celular y con programas de diferenciación específicos de tejido.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SPAG17 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SPAG17 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SPAG17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SPAG17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SPAG17.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SPAG17 para la investigación de la señalización de SPAG17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SPAG17 críticos para la función de SPAG17
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SPAG17 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SPAG17 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SPAG17 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SPAG17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SPAG17 (h) y el plásmido HDR SPAG17 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SPAG17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SPAG17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.