Sp110 Plasmide Double Nickase (h): sc-405542-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sp110 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Sp110 Double Nickase Plasmid (h) e il Sp110 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SP110. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Sp110 Antibody (B-10): sc-376741
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sp110 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405542-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sp110 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405542-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SP110 codifica Sp110, una proteina associata ai corpi nucleari, implicata nel controllo trascrizionale dipendente dalla cromatina e nella regolazione dell’immunità innata. Sp110 è collegata a programmi genici responsivi all’interferone e agli stati di attivazione dei macrofagi, e si ritiene che moduli l’architettura nucleare e la disponibilità dei fattori di trascrizione all’interno dei corpi nucleari della leucemia promielocitica (PML). Studi genetici e funzionali associano SP110 alla suscettibilità alle infezioni da micobatteri e a fenotipi immunitari infiammatori, evidenziandone la rilevanza nelle interazioni ospite–patogeno. In quanto regolatore di reti trascrizionali immunitarie, SP110 viene spesso analizzato in vie che governano la segnalazione delle citochine, la presentazione dell’antigene e le risposte antimicrobiche intrinseche della cellula.
Sp110 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SP110 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SP110. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SP110. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SP110 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.