Plásmido Doble Nickase (h) Sp110: sc-405542-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sp110 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sp110 (h) y el plásmido de doble nickasa Sp110 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SP110. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sp110 Anticuerpo (B-10): sc-376741
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sp110 | sc-405542-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sp110 | sc-405542-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SP110 codifica Sp110, una proteína asociada a los cuerpos nucleares implicada en el control transcripcional dependiente de la cromatina y en la regulación de la inmunidad innata. Sp110 se vincula a programas génicos sensibles al interferón y a estados de activación de macrófagos, y se considera que modula la arquitectura nuclear y la disponibilidad de factores de transcripción dentro de los cuerpos nucleares de la leucemia promielocítica (PML). Estudios genéticos y funcionales asocian SP110 con la susceptibilidad a la infección por micobacterias y con fenotipos inmunitarios inflamatorios, lo que destaca su relevancia en las interacciones huésped–patógeno. Como regulador de redes transcripcionales inmunitarias, SP110 se examina con frecuencia en vías que gobiernan la señalización de citocinas, la presentación de antígenos y las respuestas antimicrobianas intrínsecas de la célula.
Sp110 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SP110 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SP110. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SP110. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SP110 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.