Plásmido Doble Nickase (h) Sox2: sc-400050-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sox2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sox2 (h) y el plásmido de doble nickasa Sox2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SOX2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox2 Anticuerpo (E-4): sc-365823
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sox2 | sc-400050-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sox2 | sc-400050-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX2 codifica el factor de transcripción Sox2, un regulador central de la pluripotencia y de la especificación de linajes que mantiene la autorrenovación de las células madre a la vez que restringe los programas de diferenciación. Sox2 coopera con OCT4 y NANOG para controlar redes de potenciadores y promotores que gobiernan la accesibilidad de la cromatina, el inicio de la transcripción y las decisiones de destino celular durante el desarrollo temprano. En contextos neurales y epiteliales, SOX2 influye en el mantenimiento de progenitores e interactúa con vías de señalización como WNT, SHH y Notch para modular las trayectorias de diferenciación. La expresión desregulada de SOX2 o sus alteraciones genómicas se asocian con trastornos del desarrollo y con frecuencia se implican en circuitos transcripcionales oncogénicos, lo que respalda su amplia relevancia en la biología de las enfermedades.
Sox2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SOX2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SOX2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SOX2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SOX2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.