Plásmido Doble Nickase (m) Sox10: sc-423078-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Sox10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sox10 (m) y el plásmido de doble nickasa Sox10 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sox10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox10 Anticuerpo (A-2): sc-365692
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Sox10 | sc-423078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Sox10 | sc-423078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Sox10 de ratón codifica un factor de transcripción con dominio HMG (HMG-box) que controla la especificación del linaje de la cresta neural y la diferenciación y el mantenimiento de la glía mielinizante, incluidas las células de Schwann y los oligodendrocitos. Sox10 coordina programas transcripcionales con colaboradores como PAX3 y SOX9 para regular genes implicados en la formación de mielina, el desarrollo de nervios periféricos y la biología de los melanocitos. A través de estas redes, Sox10 influye en procesos que abarcan el compromiso del destino celular, la migración y la maduración, y su desregulación se asocia con neurocristopatías congénitas y con defectos de pigmentación o del sistema nervioso entérico. En biología del cáncer, la expresión génica alterada dependiente de SOX10 se utiliza ampliamente para estudiar el estado de linaje del melanoma, los programas de invasión y la plasticidad transcripcional en sistemas modelo relevantes.
Sox10 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sox10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sox10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sox10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sox10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.