Plásmido CRISPR de Activación (h) Sox10: sc-400129-ACT

El gen humano **SOX10** codifica el factor de transcripción **Sox10**, una proteína de unión al ADN del grupo de alta movilidad (HMG) esencial para la especificación de la cresta neural y el compromiso de linaje, en particular en programas gliales y melanocíticos. Sox10 coordina redes transcripcionales que controlan la diferenciación, la migración y la supervivencia, integrándose con vías del desarrollo y con la remodelación de la cromatina para regular la expresión de genes diana en el sistema nervioso periférico. La actividad alterada de **SOX10** se asocia con neurocristopatías que afectan el desarrollo de la glía entérica y periférica, así como con una biología melanocitaria desregulada, lo que lo convierte en un nodo valioso para estudiar decisiones de destino celular y circuitos de regulación génica. En investigación biomédica, **SOX10** se utiliza con frecuencia para analizar el control transcripcional de la mielinización, la pigmentación y la plasticidad de células derivadas de la cresta neural.

Sox10 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de SOX10 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

Sox10 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus SOX10 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional SOX10, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Sox10. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo SOX10 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Sox10 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Sox10 en células tumorales con expresión de SOX10 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.