Sox-8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406693
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Sox-8 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Sox-8, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox-8 Anticuerpo (H-7): sc-374446
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Sox-8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406693 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SOX8 codifica el factor de transcripción Sox-8, miembro de la familia SOX (SRY-related HMG-box), que se une al ADN a través de un dominio HMG para regular la especificación de linajes y los programas de diferenciación. Sox-8 participa en redes transcripcionales que controlan derivados de la cresta neural, el desarrollo de glía y oligodendrocitos, y aspectos de la biología gonadal y esquelética mediante interacciones dependientes del contexto con cofactores y con la cromatina. Al modular programas de expresión génica vinculados a decisiones de destino celular, proliferación y remodelación de la matriz extracelular, SOX8 contribuye a vías del desarrollo y a la homeostasis tisular. La expresión desregulada de SOX8 o las alteraciones en los circuitos de la familia SOX se han asociado con estados transcripcionales oncogénicos y anomalías del desarrollo, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos de la regulación génica relacionada con enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sox-8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SOX8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SOX8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SOX8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sox-8.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SOX8 para la investigación de la señalización de Sox-8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SOX8 críticos para la función de Sox-8
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SOX8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Sox-8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Sox-8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SOX8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sox-8 (h) y el plásmido HDR Sox-8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SOX8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SOX8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.