Plasmide Double Nickase (h) Sox-4: sc-401217-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sox-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sox-4 Double Nickase (h) et le plasmide Sox-4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SOX4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sox-4 Antibody (B-7): sc-518016
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sox-4 | sc-401217-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sox-4 | sc-401217-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX4 code le facteur de transcription Sox-4, membre de la famille des protéines HMG-box apparentées à SRY, qui se lient à l’ADN afin de réguler la spécification des lignages, la différenciation et les décisions de destinée cellulaire. Dans les cellules humaines, Sox-4 intègre des programmes de développement à des voies de signalisation telles que Wnt/β-caténine, TGF-β/SMAD et Notch, influençant des réseaux transcriptionnels qui contrôlent la prolifération et la transition épithélio-mésenchymateuse. Une expression dérégulée de SOX4 a été associée à des états de différenciation altérés et à des programmes transcriptionnels oncogéniques dans de nombreux types de tumeurs, ainsi qu’à des phénotypes neurodéveloppementaux et immunitaires. Ces caractéristiques font de SOX4 un nœud utile pour étudier le contrôle transcriptionnel dépendant du contexte, les transitions d’état de la chromatine et les interactions entre voies de signalisation dans des modèles pertinents pour les maladies.
Sox-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SOX4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SOX4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SOX4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SOX4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.