Sox-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401217

Descripción general

SOX4 codifica el factor de transcripción Sox-4, una proteína de unión al ADN del grupo de alta movilidad (HMG) que regula la especificación de linaje, la diferenciación y las decisiones de destino celular durante el desarrollo y la homeostasis tisular. Sox-4 participa en programas transcripcionales vinculados a las vías de señalización Wnt/β-catenina y TGF-β/SMAD, y puede influir en la transición epitelio-mesénquima, el control del ciclo celular y la apoptosis, dependiendo del contexto celular. La expresión alterada de SOX4 se ha asociado con un mantenimiento desregulado de progenitores y con redes transcripcionales aberrantes observadas en múltiples ámbitos de investigación oncológica e inmunológica. Como regulador nodal de la expresión génica, Sox-4 se estudia con frecuencia por sus efectos sobre los circuitos transcripcionales asociados a la cromatina y el “cross-talk” entre vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sox-4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SOX4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SOX4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SOX4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sox-4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SOX4 para la investigación de la señalización de Sox-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SOX4 críticos para la función de Sox-4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SOX4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Sox-4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Sox-4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SOX4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sox-4 (h) y el plásmido HDR Sox-4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SOX4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SOX4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.