Sox-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403896

Descripción general

SOX3 codifica Sox-3, un factor de transcripción con dominio HMG-box que se une al ADN y modula programas de expresión génica dependientes de la cromatina, esenciales para la especificación temprana del neuroectodermo y el mantenimiento de la identidad de los progenitores neurales. Sox-3 actúa dentro de redes reguladoras centrales del desarrollo junto con otros factores de la familia SOX, e influye en vías que controlan decisiones de destino celular, proliferación y diferenciación en el sistema nervioso central en desarrollo y el eje hipofisario. Se ha asociado la alteración de la dosis de SOX3 o la disrupción de su regulación con fenotipos del neurodesarrollo y trastornos del desarrollo hipotálamo-hipofisario, lo que subraya su relevancia para el estudio del control transcripcional durante el desarrollo humano. En entornos de investigación, SOX3 se analiza con frecuencia por su papel en el compromiso de linaje, en modelos de diferenciación neural y en la arquitectura de redes de factores de transcripción.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Sox-3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SOX3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SOX3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SOX3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Sox-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SOX3 para la investigación de la señalización de Sox-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SOX3 críticos para la función de Sox-3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SOX3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Sox-3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Sox-3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SOX3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Sox-3 (h) y el plásmido HDR Sox-3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SOX3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SOX3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.