SOCS-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402344

Descripción general

SOCS6 codifica el supresor de la señalización de citocinas 6 (SOCS-6), un miembro de la familia SOCS que atenúa la señalización de receptores y citocinas mediante su dominio SH2 y el reclutamiento de complejos de ligasa de ubiquitina dependiente de la caja SOCS. SOCS-6 participa en la regulación negativa de las vías JAK/STAT y de las tirosina quinasas receptoras, influyendo en las salidas de señalización aguas abajo de PI3K–AKT y MAPK que controlan la proliferación, la diferenciación y la supervivencia. Al modular la duración de la señal y promover el recambio de componentes de señalización activados, SOCS-6 contribuye al mantenimiento de la homeostasis celular en contextos inmunitarios y sensibles a factores de crecimiento. La expresión o función alteradas de SOCS6 se han asociado con redes de señalización desreguladas implicadas en la transformación oncogénica y en fenotipos relacionados con el sistema inmunitario, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de la retroalimentación de vías y la terminación de señales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SOCS-6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SOCS6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SOCS6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SOCS6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SOCS-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SOCS6 para la investigación de la señalización de SOCS-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SOCS6 críticos para la función de SOCS-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SOCS6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SOCS-6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SOCS-6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SOCS6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SOCS-6 (h) y el plásmido HDR SOCS-6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SOCS6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SOCS6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.