SOBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412439

Descripción general

SOBP (proteína de unión sine oculis) es una proteína nuclear implicada en programas de regulación transcripcional necesarios para el desarrollo del oído interno y del sistema sensorial, con funciones en la especificación del destino celular y el patrón tisular. La evidencia genética humana vincula variantes de pérdida de función en SOBP con sordera autosómica recesiva y fenotipos del neurodesarrollo, lo que subraya su importancia en la formación de la vía auditiva y la maduración neuronal. Por lo tanto, la alteración de SOBP es relevante para estudiar las redes de regulación génica que coordinan la diferenciación, la morfogénesis y la función de los órganos sensoriales. En modelos celulares, la disrupción de SOBP puede utilizarse para investigar respuestas transcripcionales aguas abajo y procesos de señalización del desarrollo que moldean el compromiso con linajes sensoriales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SOBP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SOBP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SOBP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SOBP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SOBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SOBP para la investigación de la señalización de SOBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SOBP críticos para la función de SOBP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SOBP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SOBP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SOBP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SOBP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SOBP (h) y el plásmido HDR SOBP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SOBP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SOBP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.