Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SNRPC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404002
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SNRPC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SNRPC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SNRPC Anticuerpo (4H12): sc-101549
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SNRPC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404002 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SNRPC codifica un componente central de la proteína Sm del ribonucleoproteína nuclear pequeña U1 (snRNP), un subcomplejo esencial del espliceosoma que reconoce los sitios de empalme 5′ y promueve un empalme preciso del pre-ARNm. Mediante el ensamblaje de partículas snRNP y la estabilización de las interacciones entre el snARN U1 y sus proteínas, SNRPC contribuye a la biogénesis del espliceosoma, al procesamiento del ARN acoplado a la transcripción y a los programas posteriores de expresión génica. La alteración de componentes del espliceosoma, incluido SNRPC, se asocia con una desregulación generalizada del empalme que puede afectar el control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y las vías de diferenciación. La función alterada del espliceosoma se ha vinculado a diversas enfermedades humanas, en particular cánceres y trastornos hereditarios impulsados por un procesamiento anómalo del ARN.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNRPC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SNRPC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SNRPC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SNRPC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNRPC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SNRPC para la investigación de la señalización de SNRPC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SNRPC críticos para la función de SNRPC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SNRPC para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SNRPC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SNRPC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SNRPC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNRPC (h) y el plásmido HDR SNRPC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SNRPC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SNRPC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.