Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SNRPA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404128
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SNRPA El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SNRPA, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SNRPA Anticuerpo (B-12): sc-376027
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SNRPA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404128 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SNRPA codifica la ribonucleoproteína nuclear pequeña U1 A, un componente central esencial del complejo U1 snRNP que reconoce los sitios de empalme 5′ durante el splicing del pre-ARNm. Al participar en el ensamblaje temprano del espliceosoma, SNRPA favorece la eliminación precisa de intrones, la maduración de los transcritos y la coordinación de programas de expresión génica acoplados a la transcripción y al procesamiento de ARN. La alteración de la función del U1 snRNP puede provocar un splicing alternativo generalizado y la inestabilidad de los transcritos, procesos que con frecuencia se han implicado en la transformación oncogénica y en fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos. Como factor espliceosomal fundamental, SNRPA se estudia comúnmente para vincular la fidelidad del splicing con la proteostasis, el control del ciclo celular y las redes de regulación del ARN sensibles al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNRPA (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SNRPA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SNRPA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SNRPA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNRPA.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SNRPA para la investigación de la señalización de SNRPA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SNRPA críticos para la función de SNRPA
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SNRPA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SNRPA CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SNRPA CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SNRPA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNRPA (h) y el plásmido HDR SNRPA (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SNRPA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SNRPA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.