Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SNAP47 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410264
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SNAP47 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SNAP47, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SNAP47 Anticuerpo (D-11): sc-514428
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SNAP47 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410264 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SNAP47 codifica una proteína de la familia de receptores SNAP (SNARE) que participa en el acoplamiento de vesículas y la fusión de membranas al interactuar con sintaxinas y VAMPs afines para regular la exocitosis y el tráfico del sistema endomembranoso. Se ha implicado en vías secretoras especializadas, incluida la liberación de neurotransmisores y la entrega regulada de carga, vinculando la actividad de SNAP47 con el ciclo de las vesículas sinápticas, el reciclaje de membranas y el control espacial de la localización de proteínas. A través de su papel en la dinámica de los complejos SNARE, SNAP47 influye en procesos celulares como el crecimiento de neuritas, el tráfico de receptores y la secreción acoplada a estímulos. La desregulación del tráfico vesicular y de la señalización sináptica es relevante en contextos de investigación neurodel desarrollo y neurodegenerativa, lo que convierte a SNAP47 en un objetivo útil para analizar fenotipos dependientes del transporte.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNAP47 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SNAP47 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SNAP47 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SNAP47 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNAP47.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SNAP47 para la investigación de la señalización de SNAP47, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SNAP47 críticos para la función de SNAP47
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SNAP47 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SNAP47 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SNAP47 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SNAP47. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNAP47 (h) y el plásmido HDR SNAP47 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SNAP47 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SNAP47 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.