Plásmido Doble Nickase (h) SMG8: sc-408902-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SMG8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SMG8 (h) y el plásmido de doble nickasa SMG8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SMG8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SMG8 | sc-408902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SMG8 | sc-408902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMG8 codifica una subunidad reguladora central del complejo quinasa SMG1 (SMG1–SMG8–SMG9), que controla la fosforilación de UPF1 y la progresión de la degradación de ARNm mediada por codones sin sentido (NMD, por sus siglas en inglés). Al modular la eficiencia de la NMD y su acoplamiento con la vigilancia de la terminación de la traducción, SMG8 ayuda a mantener la calidad del transcriptoma e influye en la homeostasis del ARN, las respuestas al estrés y la proteostasis. La alteración de los reguladores de la NMD, incluidos los componentes del complejo asociado a SMG8, puede modificar la estabilidad de ARNm aberrantes o reguladores, con efectos posteriores sobre vías que gobiernan el crecimiento y la diferenciación celular. Como resultado, SMG8 se estudia con frecuencia en el contexto del control de la expresión génica, la reconfiguración de las vías de degradación de ARN y la desregulación del transcriptoma relevante para enfermedades.
SMG8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMG8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMG8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMG8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMG8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.