Plásmido Doble Nickase (h) SMC2: sc-411488-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SMC2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SMC2 (h) y el plásmido de doble nickasa SMC2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SMC2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SMC2 | sc-411488-NIC | 20 µg | $410.00 |
SMC2 codifica una proteína esencial del mantenimiento estructural de los cromosomas que forma el andamiaje ATPasa de los complejos condensina, los cuales impulsan la condensación y organización cromosómica durante la mitosis y la meiosis. Al regular la arquitectura de la cromatina de orden superior, SMC2 favorece la correcta resolución y segregación de las cromátidas hermanas y la estabilidad del genoma, vinculando su actividad con la progresión del ciclo celular y las respuestas al daño del ADN. La compactación de la cromatina dependiente de condensina se relaciona con el estrés de replicación y las vías de reparación, donde una función alterada de la condensina puede promover inestabilidad cromosómica y aneuploidía. Se ha observado desregulación de la expresión o función de SMC2 en contextos de enfermedades proliferativas, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la fidelidad mitótica y los mecanismos de mantenimiento del genoma en células humanas.
SMC2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMC2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMC2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMC2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMC2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.