Plásmido Doble Nickase (m) Smarcad1: sc-420234-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Smarcad1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Smarcad1 (m) y el plásmido de doble nickasa Smarcad1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Smarcad1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Smarcad1 | sc-420234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Smarcad1 | sc-420234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Smarcad1** codifica un factor de remodelación de la cromatina dependiente de ATP de la familia SNF2 que ayuda a regular la dinámica de los nucleosomas durante la replicación y la reparación del ADN. SMARCAD1 participa en el reensamblaje de la cromatina en las horquillas de replicación, promueve la resección de extremos en roturas de doble cadena y favorece la recombinación homóloga, a la vez que limita eventos de recombinación aberrantes. A través de interacciones con complejos asociados a la replicación y la reparación, influye en la regulación transcripcional, el mantenimiento de la heterocromatina y la estabilidad del genoma. La alteración de la función de SMARCAD1 se ha vinculado con defectos en las respuestas al daño del ADN y en la regulación epigenética, lo que la hace relevante para estudios de inestabilidad genómica, fenotipos del desarrollo y desregulación de la cromatina asociada al cáncer.
Smarcad1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Smarcad1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Smarcad1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Smarcad1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Smarcad1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.