Slfn5 Double Nickase Plasmid (m): sc-435875-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Slfn5 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Slfn5 Double-Nickase-Plasmid (m) und Slfn5 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Slfn5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Slfn5 Double Nickase Plasmid (m) | sc-435875-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Slfn5 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-435875-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slfn5 (Schlafen-Familienmitglied 5) ist ein Interferon-stimuliertes Gen der Maus, das an der Regulation der Aktivierung und Differenzierung von Immunzellen beteiligt ist und damit angeborene Immun-Signalwege mit transkriptionellen Kontrollprogrammen verknüpft. Als Teil der Schlafen-Familie wird Slfn5 häufig im Zusammenhang mit Antworten des Typ‑I‑Interferon-/JAK–STAT-Signalwegs sowie mit breiteren antiviralen und inflammatorischen Signalnetzwerken untersucht, die Zellproliferation und Genexpression prägen. Eine veränderte Aktivität von Schlafen-Familienmitgliedern wurde mit fehlregulierten Immunantworten und inflammatorischen Phänotypen in Verbindung gebracht, wodurch Slfn5 ein relevantes Ziel für mechanistische Studien zu interferongetriebenen transkriptionellen Zuständen darstellt. In der biomedizinischen Forschung wird Slfn5 genutzt, um zu untersuchen, wie Zytokin-Signale Chromatin und Transkription umgestalten und dadurch Immunhomöostase sowie krankheitsrelevante Entzündungsmodelle beeinflussen.
Slfn5 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Slfn5-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Slfn5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Slfn5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Slfn5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.