Slfn5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408333-NIC

A SLFN5 (Slfn5) humana é uma proteína da família Schlafen estimulada por interferon, implicada na regulação de programas transcricionais ligados à imunidade inata, ao controle do ciclo celular e à diferenciação celular. Foi relatado que a Slfn5 modula a expressão gênica a jusante da sinalização interferon/JAK–STAT e influencia redes de resposta inflamatória e antiviral, incluindo efeitos sobre a regulação transcricional associada à cromatina. A expressão alterada de SLFN5 tem sido associada a mudanças na proliferação e migração de células tumorais e em assinaturas gênicas relacionadas ao sistema imune em múltiplos contextos de câncer, sustentando sua utilidade como um nó mecanístico em estudos de sinalização oncogênica e inflamatória. Essas propriedades tornam a SLFN5 um alvo relevante para dissecar vias induzidas por interferon, regulação transcricional e fenótipos dependentes do contexto em modelos de células humanas.

Slfn5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLFN5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLFN5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLFN5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLFN5 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.