Slfn14 Plasmide Double Nickase (h): sc-415573-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Slfn14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Slfn14 Double Nickase Plasmid (h) e il Slfn14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLFN14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Slfn14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415573-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Slfn14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-415573-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLFN14 (membro 14 della famiglia Schlafen) codifica Slfn14, una presunta proteina associata all’RNA implicata nella regolazione della traduzione e del metabolismo dell’RNA durante lo stress cellulare e la differenziazione. Come parte della famiglia genica Schlafen, Slfn14 è stata collegata alla modulazione di programmi legati al sistema immunitario e al controllo della sintesi proteica, con effetti che intersecano vie coinvolte nella funzione del ribosoma e nella regolazione post-trascrizionale. Nell’uomo, varianti di SLFN14 sono associate a trombocitopenia ereditaria e a difetti della funzione piastrinica, a supporto di un ruolo nella maturazione dei megacariociti e nella biologia delle piastrine. Queste caratteristiche rendono SLFN14 un bersaglio utile per analizzare i meccanismi dell’ematopoiesi, della gestione dell’RNA e del controllo dell’espressione genica in modelli cellulari pertinenti.
Slfn14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLFN14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLFN14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLFN14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLFN14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.