Plásmido Doble Nickase (h) Slfn14: sc-415573-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Slfn14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Slfn14 (h) y el plásmido de doble nickasa Slfn14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLFN14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Slfn14 | sc-415573-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Slfn14 | sc-415573-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLFN14 (miembro 14 de la familia Schlafen) codifica Slfn14, una proteína presuntamente asociada al ARN, implicada en la regulación de la traducción y del metabolismo del ARN durante el estrés celular y la diferenciación. Como parte de la familia génica Schlafen, Slfn14 se ha vinculado a la modulación de programas relacionados con la inmunidad y al control de la síntesis proteica, con efectos que convergen en vías que gobiernan la función ribosomal y la regulación postranscripcional. En humanos, variantes en SLFN14 se asocian con trombocitopenia hereditaria y defectos en la función plaquetaria, lo que respalda un papel en la maduración de los megacariocitos y en la biología de las plaquetas. Estas características hacen de SLFN14 una diana útil para analizar mecanismos de hematopoyesis, manejo del ARN y control de la expresión génica en modelos celulares relevantes.
Slfn14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLFN14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLFN14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLFN14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLFN14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.