Plasmide Double Nickase (h) Slfn12: sc-404339-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Slfn12 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Slfn12 Double Nickase (h) et le plasmide Slfn12 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLFN12. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Slfn12 | sc-404339-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Slfn12 | sc-404339-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SLFN12** code la protéine Schlafen, membre de la famille 12 (Slfn12), une protéine cytosolique impliquée dans la régulation de la différenciation cellulaire et le contrôle post‑transcriptionnel de l’expression génique. Les protéines SLFN sont largement associées à la modulation du métabolisme de l’ARN et des programmes de traduction qui façonnent la prolifération et les réponses adaptatives au stress, ce qui place SLFN12 à l’interface entre le contrôle de la croissance et les transitions d’état cellulaire. Des altérations de l’activité de SLFN12 et de ses profils d’expression ont été étudiées dans des contextes où l’équilibre entre différenciation et cycle cellulaire est perturbé, ce qui étaye sa pertinence pour des études mécanistiques de la croissance dérégulée et de l’engagement de lignée dans des modèles associés à des maladies. En tant que composante du réseau Schlafen plus vaste, induit par l’interféron, SLFN12 est également utilisé pour explorer comment la signalisation de l’immunité innée s’articule avec les mécanismes fondamentaux de contrôle de l’expression génique.
Slfn12 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLFN12 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLFN12. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLFN12. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLFN12.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.